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Il fut élevé à l'abbaye de Luxeuil et y mena la vie monastique jusqu'au jour où il devint évêque de Besançon. Il était très austère pour lui-même et pour les autres. Sa mère, Flavie, ayant fondé un monastère de femmes dans sa ville, il en rédigea les règles en 77 chapitres que nous avons encore et dont l'austérité est effrayante. Les sœurs qui parlaient à table, par exemple, recevaient six coups de fouet. Ou encore, il était interdit de servir la moindre nourriture aux "visiteurs du sexe masculin" y compris les évêques et les abbés, pour les forcer à abréger leurs visites au couvent.
"Désorganisé pendant un temps, le diocèse reprend vie au début du VIIe siècle; c'est l'époque où, de Luxeuil, rayonne l'influence de saint Colomban dont un disciple, saint Donat, devient évêque de Besançon." (diocèse de Besançon)
À Besançon, après 656, saint Donat, évêque, qui rédigea, pour les vierges consacrées, une Règle à partir des prescriptions des saints Benoît, Colomban et Césaire.
Martyrologe romain